2×PCR Titunto Mix (laisi Dye)
PCR Master Mix jẹ iru ojutu iṣapejọ PCR ti aṣa eyiti o ṣetan lati lo, pẹlu Taq DNA Polymerase, dNTP mix MgCl2 ati ifipamọ iṣapeye.Lakoko iṣesi, alakoko ati awoṣe nikan ni a le ṣafikun fun imudara, eyiti o rọrun pupọ awọn igbesẹ iṣiṣẹ ti idanwo.Ọja yii ni awọn amuduro to dara julọ ati pe o le wa ni ipamọ fun awọn oṣu 3 ni 4℃.Ọja PCR ni 3′-dA protrusion ati pe o le ni irọrun cloned sinu T fekito.
Awọn ipo ipamọ
Ọja naa yẹ ki o wa ni ipamọ ni -25 ℃ ~ -15 ℃ fun ọdun meji.
Awọn pato
| Iduroṣinṣin (vs.Taq) | 1× |
| Gbona Bẹrẹ | No |
| Overhang | 3′-A |
| Polymerase | Taq DNA Polymerase |
| Ifaseyin kika | SuperMix tabi Titunto Mix |
| Iyara lenu | Standard |
| Ọja Iru | PCR Titunto Mix (2×) |
Awọn ilana
1.ifaseyin System
| Awọn eroja | Iwọn (μL) |
| DNA awoṣe | Dara |
| Alakoko 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Alakoko 2 (10 μmol/L) | 2 |
| PCR Titunto Mix | 25 |
| ddH2O | Si 50 |
2.Ilana Imudara
| Awọn igbesẹ yipo | Iwọn otutu (°C) | Aago | Awọn iyipo |
| Pre-denaturation | 94 ℃ | 5 min | 1 |
| Denaturation | 94 ℃ | 30 iṣẹju-aaya | 35 |
| Annealing | 50-60 ℃ | 30 iṣẹju-aaya | |
| Itẹsiwaju | 72 ℃ | 30-60 iṣẹju-aaya/kb | |
| Ipari Ipari | 72 ℃ | 10 min | 1 |
Awọn akọsilẹ:
1) Lilo awoṣe: 50-200 ng DNA genomic;0.1-10 ng DNA pilasima.
2) mg2+ifọkansi: Ọja yii ni 3 mM ti MgCl2 ti o dara fun ọpọlọpọ awọn aati PCR.
3) Annealing otutu: Jọwọ tọkasi awọn tumq si iye Tm ti alakoko.Iwọn otutu mimu le ṣee ṣeto si 2-5 ℃ kekere ju iye imọ-jinlẹ ti alakoko lọ.
4) Akoko itẹsiwaju: Fun idanimọ molikula, 30 iṣẹju-aaya / kb ni a ṣe iṣeduro.Fun ẹda ẹda, 60iṣẹju-aaya/kb niyanju.
Awọn akọsilẹ
1.Fun ailewu ati ilera rẹ, jọwọ wọ awọn aṣọ laabu ati awọn ibọwọ isọnu fun iṣẹ.
2.Fun lilo iwadi nikan!
