Multiplex Ọkan Igbesẹ RT-qPCR Premix
Apejuwe
Nọmba ologbo: HCR5141A
Multiplex Ọkan Igbesẹ RT-qPCR Premix jẹ Apo PCR pipo pupọ ti o da lori RNA gẹgẹbi awoṣe.Ninu idanwo naa, transcription yiyipada ati PCR pipo ni a ṣe ni tube ifasẹyin kanna, mimu iṣẹ ṣiṣe idanwo dirọ ati idinku eewu ti ibajẹ.Apẹrẹ alailẹgbẹ ti ifipamọ ati idapọ enzymu le ṣee lo ni eto lyophilized-igbesẹ kan.Ohun elo naa n lo Reverse Transcriptase sooro ooru fun iṣelọpọ daradara ti cDNA okun akọkọ nipa lilo hotstart Taq DNA Polymerase fun titobi titobi.O ni ifasilẹ ifasilẹ iṣapeye, idapọ awọn enzymu ati bẹbẹ lọ, ati awọn ifosiwewe ti o munadoko dojuti imudara PCR ti kii ṣe pato ati mu imudara imudara ti awọn aati qPCR lọpọlọpọ ni a ṣafikun, ti n mu iwọn titobi fluorescence lọpọlọpọ lakoko ṣiṣe idaniloju ṣiṣe imudara ti awọn alakoko.
Awọn eroja
| Oruko |
| 1. Lyo-Buffer |
| 2. Lyo-Enzyme Mix |
| 3. Lyo aabo |
Ipo gbigbeion
A: Lyo-buffer ati aabo: -25 ~ -15 ℃, igbesi aye selifu jẹ ọdun 1.
B: Lyo-enzyme Mix, 2-8 ℃, igbesi aye selifu jẹ oṣu mẹfa.
Ilana fun isẹ
1. Reaction System (Mu 25μL bi apẹẹrẹ)
| Awọn eroja | Iwọn didun (μL) | Ifojusi ipari |
| Lyo-Buffer | 6 | 1* |
| Lyo-Enzyme Mix | 1 | - |
| Lyo-Aabo | 8 | - |
| Adalu alakoko (10μM) | 1 | 0.1-1uM |
| Iparapọ Iwadi (10μM) | 0.5 | 0.05-0.5uM |
| RNA Àdàkọ | 5 | - |
| DEPC H2O | Titi di 25 | - |
2. Iṣapeye gigun kẹkẹ Ilana
1) Standard gigun kẹkẹ Ilana
| Ipele ifaseyin | Iwọn otutu | Aago | Yiyipo | |
| 1 | Yiyipada transcription | 50°Ca | 10 min | 1 |
| 2 | Ibẹrẹ denaturation | 95°C | 5 min | 1 |
| 3 | Idahun imudara | 95°C | 15 iṣẹju-aaya | 45 iyipo |
| 60°Cb | 30 iṣẹju-aayac |
2) Ilana gigun kẹkẹ iyara
|
| Ipele ifaseyin | Iwọn otutu | Aago | Yiyipo |
| 1 | Yiyipada transcription | 50°Ca | 2 min | 1 |
| 2 | Ibẹrẹ denaturation | 95°C | 2 iṣẹju-aaya | 1 |
| 3 | Idahun imudara | 95°C | 1 iṣẹju-aaya |
45 iyipo |
| 60°Cb | 13 iṣẹju-aayac |
Akiyesi:
a) Yipada transcription: Awọn iwọn otutu le yan 42°C tabi 50°C fun 10-15 iṣẹju.
b) Idahun imudara: A ṣe atunṣe iwọn otutu ni ibamu si iye Tm ti awọn alakoko ti a ṣe apẹrẹ.
c)Fuluorisun ifihan agbara akomora: Jọwọ ṣeto awọn esiperimenta ilana gẹgẹ bi awọn ibeere ti awọniwe ohun elo.
Imọ Alaye / ni pato
| Gbona Bẹrẹ | Ibẹrẹ gbona ti a ṣe sinu |
| Ọna wiwa | Iwari akọkọ-iwadii |
| PCR ọna | Ọkan igbese RT-qPCR |
| Iru apẹẹrẹ | RNA |
Awọn akọsilẹ
1. Ọja yii jẹ fun lilo iwadi nikan.
2. Jọwọ wọ PPE pataki, iru ẹwu lab ati awọn ibọwọ, lati rii daju ilera ati ailewu rẹ!
