Ultra Nuclease GMP-ite
Nọmba ologbo: HC2016A
UltraNuclease GMP-grade jẹ kosile ati di mimọ ni Escherichia coli (E.coli) nipasẹ iṣelọpọ jiini ati pese sile labẹ awọn agbegbe GMP.O le dinku viscosity ti supernatant sẹẹli ati sẹẹli lysate ninu iwadii imọ-jinlẹ, mu iṣẹ ṣiṣe mimọ amuaradagba pọ si ati mu iwadii iṣẹ ṣiṣe amuaradagba pọ si.Ọja naa tun le dinku awọn iṣẹku acid nucleic ogun si pg-grade, imudarasi iṣẹ ati ailewu ti awọn ọja ti ibi ti awọn ohun elo pẹlu iwẹwẹnu ọlọjẹ, iṣelọpọ ajesara, ati iṣelọpọ amuaradagba/polysaccharide elegbogi.Yato si, ọja naa tun le lo lati ṣe idiwọ iṣupọ ti awọn sẹẹli mononuclear ẹjẹ agbeegbe eniyan (PBMC) ni itọju sẹẹli ati idagbasoke ajesara.
UltraNuclease ti pese ni irisi reagent sterilized, eluted ni ifipamọ (20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glycerin), pẹlu irisi awọ ti ko ni awọ, omi sihin.Ọja yii jẹ iṣelọpọ nipasẹ awọn ibeere ilana GMP ati pese ni fọọmu omi kan.
Awọn eroja
UltraNuclease GMP-ite (250 U/μL)
Awọn ipo ipamọ
Ọja naa ti wa ni gbigbe pẹlu yinyin gbigbẹ ati pe o le wa ni ipamọ ni -25℃ ~ -15°C fun ọdun meji.
Ti ọja naa ba ṣii ati pe o ti fipamọ ni 4℃ fun diẹ ẹ sii ju ọsẹ kan lọ, a ṣeduro sisẹọja naa lati ṣe idiwọ ibajẹ makirobia.
Awọn pato
| Gbalejo ikosile | Recombinant E. coli pẹlu UltraNuclease pupọ |
| Òṣuwọn Molikula | 26,5 kDa |
| soelectric ojuami | 6.85 |
| Mimo | ≥99% (SDS-iwe) |
| Ifipamọ ipamọ | 20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glycerin |
|
Unit Definition | Itumọ ti ọkan aṣayan iṣẹ-ṣiṣe (U) ni iye ti enzymu ti a lo latiyi iye gbigba ti ΔA260 pada nipasẹ 1.0 ni iṣẹju 30 ni 2. 625 milimita kaneto ifaseyin ni 37 ℃ pẹlu pH ti 8.0 (deede lati pari tito nkan lẹsẹsẹ ti37 μg salmon sperm DNA sinu oligonucleotides). |
Awọn ilana
1. Apeere Gbigba
Awọn sẹẹli ti o tẹle: yọ alabọde kuro, wẹ awọn sẹẹli pẹlu PBS, ki o si yọ supernatant kuro.
Awọn sẹẹli idadoro: gba awọn sẹẹli nipasẹ centrifugation, fọ awọn sẹẹli pẹlu PBS, centrifuge ni 6,000rpm fun iṣẹju 10, gba pellet.
Escherichia coli: gba awọn kokoro arun nipasẹ centrifugation, wẹ lẹẹkan pẹlu PBS, centrifuge ni 8,000rpm fun iṣẹju 5, ati gba pellet naa.
2. Ayẹwo Itọju
Ṣe itọju awọn pellets sẹẹli ti a gba pẹlu ifipamọ lysis ni ipin ti iwọn (g) si iwọn didun (mL) 1: (10-20), tabi nipasẹ awọn ọna ẹrọ tabi kemikali lori yinyin tabi ni iwọn otutu yara (1g ti pellet sẹẹli ni nipa nipa
109 awọn sẹẹli).
3. Itọju Enzymu
Fi 1-5mM MgCl kun si eto ifaseyin ati ṣatunṣe pH si 8-9.
Ṣafikun UltraNuclease ni ibamu si ipin ti awọn ẹya 250 lati da 1 g ti awọn pellets sẹẹli, ṣafikun ni 37℃ fun diẹ sii ju ọgbọn iṣẹju lọ.Jọwọ tọka si fọọmu “Aago Idahun ti a ṣeduro” lati yan eyiiye akoko itọju naa.
4. Alabojuto Gbigba
Centrifuge ni 12,000 rpm fun ọgbọn išẹju 30 ki o gba supernatant naa.
Akiyesi: Ti ojutu ba jẹ ekikan tabi ipilẹ, tabi ni awọn ifọkansi giga ti iyọ, awọn ohun-ọgbẹ, tabiDenaturants, jọwọ mu awọn henensiamu doseji tabi fa awọn akoko itọju ni ibamu.
Niyanju lenu conditions
| Paramita | Ipo ti o dara julọ | Munadoko Ipò |
| Mg²+ Ifojusi | 1-5 mm | 1-10 milimita |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Iwọn otutu | 37 ℃ | 0-42℃ |
| DTT ifọkansi | 0-100 milimita | >0 mM |
| Mercaptoethanol Ifojusi | 0-100 milimita | >0 mM |
| Monovalent Cation fojusi | 0-20 mm | 0-150 milimita |
| Phosphate lon Ifojusi | 0-10 milimita | 0-100 milimita |
Ti ṣe iṣeduro Idahun Aago (37 ℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| Iye UltraNuclease (Idojukọ Ikẹhin) | Aago idahun |
| 0.25 U/ml | > 10 wakati |
| 2.5 U/ml | > 4h |
| 25 U/ml | 30 min |
Awọn akọsilẹ:
Jọwọ wọ PPE pataki, iru ẹwu lab ati awọn ibọwọ, lati rii daju ilera ati ailewu rẹ!
