Inhibitor Rnase (Glycerol ọfẹ)
Murine RNase inhibitor jẹ oludaniloju murine RNase ti o tun ṣe afihan ati mimọ lati E.coli.O sopọ mọ RNase A, B tabi C ni ipin 1: 1 nipasẹ isunmọ ti kii ṣe covalent, nitorinaa idilọwọ iṣẹ ṣiṣe ti awọn enzymu mẹta ati aabo RNA lati ibajẹ.Sibẹsibẹ, Ko munadoko lodi si RNase 1, RNase T1, S1 Nuclease, RNase H tabi RNase lati Aspergillus.Murine RNase inhibitor ni idanwo nipasẹ RT-PCR, RT-qPCR ati IVT mRNA, ati pe o ni ibamu pẹlu ọpọlọpọ awọn iwe afọwọkọ Reverse ti iṣowo, awọn polymerases DNA ati awọn polymerases RNA.
Ti a ṣe afiwe si awọn inhibitors RNase eniyan, inhibitor RNase murine ko ni awọn cysteine meji ti o ni itara pupọ si oxidation eyiti o fa aiṣiṣẹ ti inhibitor.Iyẹn jẹ ki o jẹ iduroṣinṣin ni awọn ifọkansi kekere ti DTT (kere ju 1 mM).Ẹya yii jẹ ki o dara fun lilo ninu awọn aati nibiti awọn ifọkansi giga ti DTT jẹ ikolu si iṣesi (fun apẹẹrẹ RT-PCR akoko gidi).
Aohun elo
Ọja yii le jẹ lilo pupọ ni eyikeyi idanwo nibiti kikọlu RNase ṣee ṣe lati yago fun ibajẹ RNA, gẹgẹbi:
1.First-strand cDNA synthesis, RT-PCR, RT-qPCR, bbl;
2.Protect RNA lati ibaje ni in-vitro transcription / itumọ (fun apẹẹrẹ viral replication in vitro);
3.Inhibition ti RNase aṣayan iṣẹ-ṣiṣe nigba RNA ipinya ati ìwẹnumọ.
Awọn ipo ipamọ
Itaja ni -25~-15℃;
Di-di-ọmọ cycles ≤ 5 igba;
Wulo fun ọdun 1.
Itumọ ẹyọkan
Ẹyọ kan jẹ asọye bi iye Inhibitor RNase ti o nilo lati dojuti iṣẹ ṣiṣe ti 5 ng ti RNase A nipasẹ 50%.
Ìwúwo molikula
Inhibitor RNase (Glycerol-free) jẹ amuaradagba 50 kDa.
Iṣakoso didara
Exonuclease Iṣẹ́:
Imudara ti 40 U ti enzymu pẹlu 1 μg λ-Hind III digest DNA fun awọn wakati 16 ni 37 ° C yorisi ni ko si ibajẹ ti o rii ti DNA gẹgẹbi ipinnu nipasẹ gel electrophoresis.
Iṣẹ ṣiṣe endonuclease:
Imudaniloju ti 40 U ti enzymu pẹlu 1 μg λ DNA fun awọn wakati 16 ni 37 ° C ko ni idibajẹ ti DNA ti o ṣawari gẹgẹbi ipinnu nipasẹ gel electrophoresis.
Fifẹ Iṣẹ́:
Isọdi ti 40 U ti enzymu pẹlu 1 μg pBR322 fun awọn wakati 16 ni 37℃ yorisi ni ko si ibajẹ ti o rii ti DNA gẹgẹbi ipinnu nipasẹ gel electrophoresis.
RNase Iṣẹ-ṣiṣe:
Isọdi ti 40 U ti henensiamu pẹlu 1.6 μg MS2 RNA fun awọn wakati 4 ni 37℃ yorisi ni ko si ibajẹ ti a rii ti RNA gẹgẹbi ipinnu nipasẹ gel electrophoresis.
E.coli DNA:
40 U ti Enzyme jẹ wiwa nipasẹ TaqMan qPCR.DNA E.coli jẹ ≤ 0. 1pg/40U.
Notes
1.Don't gbọn tabi aruwo ni agbara lati ṣe idiwọ imuṣiṣẹ enzymu.
2.RNase inhibitor n ṣiṣẹ ni awọn iwọn otutu ti o wa lati 25℃ si 55℃ ati pe a ko ṣiṣẹ ni ≥65℃.
3.Awọn iṣẹ ti RNase H, RNase 1, ati RNase T1 ko ni idinamọ.
4.The pH ibiti o fun idinamọ RNase aṣayan iṣẹ-ṣiṣe ni fife (nṣiṣẹ ni pH 5-9), ifihan ti o pọju aṣayan iṣẹ-ṣiṣe ni pH 7-8.