Igbesẹ kan Yara RT-qPCR Probe Premix-UNG
Nọmba ologbo: HCR5143A
Ọkan Igbesẹ RT-qPCR Apo Probe (FUN FAST) jẹ ohun elo wiwa iyara ti RT-qPCR ti o da lori ti o dara fun PCR-ẹyọkan tabi multiplex pipo ni lilo RNA gẹgẹbi awoṣe (bii ọlọjẹ RNA).Ọja yii nlo iran tuntun ti Taq DNA Polymerase ti aṣetunṣe antibody ati igbẹhin-igbesẹ kan Reverse Transcriptase, pẹlu ifipamọ iṣapeye fun imudara iyara, eyiti o ni iyara imudara yiyara, ṣiṣe imudara giga ati pato.O ṣe atilẹyin imudara iwọntunwọnsi ni mejeeji-plex ati multiplex ti kekere ati awọn ayẹwo ifọkansi giga ni igba diẹ.
Awọn eroja
1. 5× RT-qPCR ifipamọ (U+)
2. Àkópọ̀ Enzyme (U+)
Awọn akọsilẹ:
a.5×RT-qPCR ifipamọ (U+) pẹlu dNTP ati Mg2+;
b.Enzyme mix (U+) pẹlu iyipada transcriptase, Hot Start Taq DNA polymerase, RNase inhibitor ati UDG;
c.Lo awọn imọran Ọfẹ RNase, awọn tubes EP, ati bẹbẹ lọ.
Ṣaaju lilo, dapọ daradara 5×RT-qPCR saarin (U+).Ti ojoriro eyikeyi ba wa lẹhin gbigbẹ, duro fun ifipamọ lati pada si iwọn otutu yara, dapọ ati tu, lẹhinna lo wọn deede.
Awọn ipo ipamọ
Ọja naa wa pẹlu yinyin gbigbẹ ati pe o le wa ni ipamọ ni -25 ~ -15 ℃ fun ọdun kan.
Awọn ilana
1. Ifesi Eto
Awọn eroja | Iwọn didun (20 μL ifaseyin) |
2 ×RT-qPCR ifipamọ | 4μL |
Apapọ Enzyme (U+) | 0.8μL |
Alakoko Siwaju | 0.1 ~ 1.0μM |
Alakoko Yiyipada | 0.1 ~ 1.0μM |
TaqMan Ìwádìí | 0.05 ~ 0.25μM |
Àdàkọ | X μL |
Omi Ọfẹ RNase | to 25 μl |
Awọn akọsilẹ: Iwọn idahun jẹ 10-50μL.
2. Ilana Gigun kẹkẹ (Standard)
Yiyipo igbese | Iwọn otutu. | Aago | Awọn iyipo |
Yiyipada Transcription | 55 ℃ | 10 min | 1 |
Ibẹrẹ Denaturation | 95 ℃ | 30 iṣẹju-aaya | 1 |
Denaturation | 95 ℃ | 10 iṣẹju-aaya | 45 |
Annealing / Itẹsiwaju | 60 ℃ | 30 iṣẹju-aaya |
Ilana gigun kẹkẹ (Yára) Yiyipo igbese |
Iwọn otutu. |
Aago |
Awọn iyipo |
Yiyipada Transcription | 55 ℃ | 5 min | 1 |
Ibẹrẹ Denaturation | 95 ℃ | 5 s | 1 |
Denaturation | 95 ℃ | 3 iṣẹju-aaya | 43 |
Annealing / Itẹsiwaju | 60 ℃ | 10 iṣẹju-aaya |
Awọn akọsilẹ:
a.Iwọn iyipada iyipada jẹ laarin 50℃ si 60℃, jijẹ iwọn otutu ṣe iranlọwọ lati pọsi awọn ẹya eka ati awọn awoṣe akoonu CG giga;
b.Iwọn otutu annealing ti o dara julọ nilo lati ṣatunṣe da lori iye Tm ti alakoko, ki o yan akoko ti o kuru ju fun gbigba ifihan agbara fluorescence ti o da lori ohun elo PCR Akoko gidi.
Awọn akọsilẹ
Jọwọ wọ PPE pataki, iru ẹwu lab ati awọn ibọwọ, lati rii daju ilera ati ailewu rẹ!