Igbesẹ kan RT-qPCR SYBR Green Premix
Nọmba ologbo: HCB5140A
Igbesẹ kan RT-qPCR Syber Green Premix jẹ fun titobi fluorescence ti o da lori SYBR Green I dye.Lilo awọn alakoko kan pato-jiini, iyipada iyipada ati awọn aati qPCR ti pari ni ọpọn kan, imukuro iwulo fun ṣiṣi fila-tuntun ati awọn iṣẹ pipetting, imudara iṣẹ ṣiṣe aseyege pupọ ati idinku eewu ti ibajẹ.Fun awọn ayẹwo RNA, ohun elo naa lo Reverse Transcriptase sooro ooru fun iṣelọpọ cDNA to munadoko ati HotStart Taq DNA Polymerase fun imudara pipo.Labẹ eto ifipamọ iṣapeye, ifamọ ti kit le jẹ giga bi 0.1 pg fun awọn ibi-afẹde ti a fihan gaan ati giga bi 1 pg fun awọn ibi-afẹde niwọntunwọnsi.Ohun elo naa dara fun imudara ati iwọn awọn ayẹwo DNA.O jẹ ki wiwa ifura ati iṣiro ti awọn acids nucleic lati oriṣiriṣi ọgbin ati awọn ayẹwo ẹranko, awọn sẹẹli ati awọn microorganisms.
Awọn eroja
| No | Oruko | Iwọn didun | Iwọn didun |
| 1 | To ti ni ilọsiwaju saarin | 250 μL | 2× 1.25 milimita |
| 2 | To ti ni ilọsiwaju Enzymu Mix | 20 μL | 200 μL |
| 3 | RNase Ọfẹ H2O | 250 μL | 2× 1.25 milimita |
Awọn ipo ipamọ
Ọja yii yẹ ki o wa ni ipamọ ni -25 ~ -15 ℃ kuro lati ina fun ọdun kan.
Awọn ilana
1.Reaction eto iṣeto nid
| Awọn eroja | Iwọn didun (μL) | Iwọn didun (μL) | Ifojusi ikẹhin |
| To ti ni ilọsiwaju saarin | 12.5 | 25 | 1× |
| To ti ni ilọsiwaju Enzymu Mix | 1 | 2 | - |
| Alakoko siwaju (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
| Yipada alakoko (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
| RNA Tamplateb | X | X | - |
| RNase Ọfẹ H2Oc | si 25 | si 50 | - |
Awọn akọsilẹ:
1) a.TIfojusi alakoko ikẹhin jẹ 0.2 μmol/L, eyiti o tun le ṣatunṣe laarin 0.1 ati 1μmol/L bi o ṣe yẹ.
2) b.Reagent jẹ ifarabalẹ pupọ, pẹlu Lapapọ RNA ni iwọn 1pg-1μg, ati idanwo ti awọn ayẹwo eniyan ṣe afihan igbewọle to dara julọ ti 1 pg-100 ng, iṣakoso fun iye Ct lapapọ ni iwọn 15-30 bi o ṣe yẹ.
3) c.O ti wa ni niyanju lati lo 20μL tabi 50μL lati rii daju awọn Wiwulo ati reproducibility ti afojusun jiini ampilifaya.
4) d.Jọwọ mura silẹ ni ibujoko mimọ-pupa ati lo awọn imọran ti ko ni ijẹku nuclease ati awọn tubes ifura;awọn imọran pẹlu awọn katiriji àlẹmọ ni a ṣe iṣeduro.Yago fun idoti agbelebu ati idoti aerosol.
2.Eto ifaseyin
| Igbesẹ iyipo | Iwọn otutu. | Aago | Awọn iyipo |
| Yiyipada transcription | 50℃a | 6 min | 1 |
| Ibẹrẹ denaturation | 95℃ | 5 min | 1 |
| Idahun imudara | 95℃ | iṣẹju-aaya 15 | 40 |
| 60℃b | 30 iṣẹju-aaya | ||
| Yo ipele ti tẹ | Awọn aiyipada Irinṣẹ | 1 | |
Awọn akọsilẹ:
1) a.Iwọn iyipada iyipada le ṣee yan laarin 50-55°C ni ibamu si awọn iwulo idanwo.Fun awọn ayẹwo DNA, ilana iṣipopada le ti yọkuro.
2) b.Ni awọn ọran pataki annealing / iwọn otutu itẹsiwaju le ṣe atunṣe ni ibamu si iye alakoko Tm, 60°C ni a gbaniyanju.
Awọn akọsilẹ
1. Ọja yii jẹ fun lilo iwadi nikan.
2. Jọwọ ṣiṣẹ pẹlu awọn ẹwu laabu ati awọn ibọwọ isọnu, fun aabo rẹ.
