2× HiF Taq plus Titunto Mix
Nla: HCR2014B
HIF Taq pẹlu Adapọ Titunto (Pẹlu Dye) jẹ ojutu iṣaaju-lati-lo 2 × ti o ni Plus HIF DNA Polymerase, dNTPs, ati ifipamọ iṣapeye.Awọn egboogi monoclonal meji ni iwọn otutu yara ti o ṣe idiwọ iṣẹ ṣiṣe polymerase ati 3′→ 5′exonuclease aṣayan iṣẹ-ṣiṣe ti wa ni afikun si akojọpọ titunto si fun irọrun ati giga kan pato Hot Start PCR.Ifaagun itẹsiwaju ti wa ni afikun si akojọpọ titunto si lati fun enzymu naa ni agbara imudara ajẹku gigun, ipari ti ampilifaya le jẹ to 13 kb, enzymu naa ni iṣẹ-ṣiṣe 5′→3′ DNA polymerase ati 3′→5′′ iṣẹ exonuclease, iṣootọ rẹ jẹ awọn akoko 83 ti Taq DNA polymerase, eyiti o jẹ awọn akoko 9 ti polymerase DNA lasan.O dara fun imudara ti awọn awoṣe eka, ọja imudara naa jẹ opin ti ko dara.
2 × HIF Taq pẹlu Adapọ Titunto (Pẹlu Dye) ni awọn anfani ti iyara ati irọrun, ifamọ giga, iyasọtọ ti o lagbara, iduroṣinṣin to dara, ati bẹbẹ lọ, eto ifakalẹ nikan nilo lati ṣafikun awọn alakoko ati awọn awoṣe, ati pe o le ṣe alekun nipasẹ meji- Ilana igbesẹ, irọrun awọn igbesẹ idanwo ati fifipamọ akoko.Ọja yii ni awọn awọ atọka electrophoresis, ati awọn ọja PCR le ṣee lo taara fun electrophoresis.Ni afikun, ọja naa tun ni oluranlowo aabo kan pato, ki apopọ titunto si le ṣetọju iṣẹ iduroṣinṣin lẹhin didi-diẹ leralera.
Awọn ipo ipamọ
Awọn ọja yẹ ki o wa ni ipamọ ni -25 ~ -15 ℃ fun 1 odun.
Awọn pato
ọja sipesifikesonu | Titunto Mix |
Ifojusi | 2× |
Gbona Bẹrẹ | Ibẹrẹ Gbona ti a ṣe sinu |
Overhang | Púrú |
Iyara lenu | Iyara |
Iwọn (Ọja Ipari) | Titi di 13kb |
Awọn ipo fun gbigbe | Yinyin gbigbẹ |
Iru ọja | Ga ifaramọ PCR premixes |
Awọn ilana
1.PCR ifaseyin System
Awọn eroja | Iwọn didun (μL) |
DNA Àdàkọ | Dara |
Alakoko siwaju (10 μmol/L) | 2.5 |
Yipada alakoko (10 μmol/L) | 2.5 |
2×HIF Taq plus Titunto Mix | 25 |
ddH2O | si 50 |
2.Iṣeduro lilo awọn awoṣe oriṣiriṣi
Iru awoṣe | Ṣe alekun awọn ajẹkù lati 1kb si 10 kb |
DNA jinomiki | 50ng-200 ng |
Plasmid tabi DNA gbogun ti | 10pg-20ng |
cDNA | 1-2.5 µL (Maṣe kọja 10% ti iwọn idahun PCR ikẹhin) |
3.Ilana Imudara
1) Ilana Igbesẹ Meji (awoṣe eka)
Igbesẹ iyipo | Iwọn otutu. | Aago | Awọn iyipo |
Ibẹrẹ denaturation | 98℃ | 3 min | 1 |
Denaturation | 98℃ | 10 iṣẹju-aaya | 30-35 |
Itẹsiwaju | 68℃ | 30 iṣẹju-aaya/kb | |
Ipari ipari | 72℃ | 5 min | 1 |
2) Ilana Igbesẹ Mẹta (ilana deede)
Igbesẹ iyipo | Iwọn otutu. | Aago | Awọn iyipo |
Ibẹrẹ denaturation | 98℃ | 3 min | 1 |
Denaturation | 98℃ | 10 iṣẹju-aaya | 30-35 |
Annealing | 60℃ | 20 iṣẹju-aaya | |
Itẹsiwaju | 72℃ | 30 iṣẹju-aaya/kb | |
Ipari ipari | 72℃ | 5 min | 1 |
3) Ilana Annealing Gradient (awoṣe eka)
Igbesẹ iyipo | Iwọn otutu | Aago | Awọn iyipo |
Ibẹrẹ denaturation | 98℃ | 3 min | 1 |
Denaturation | 98℃ | 10 iṣẹju-aaya | 15 (Idinku 1℃ fun iyipo kọọkan) |
Annealing gradient | 70-55 ℃ | 20 iṣẹju-aaya | |
Itẹsiwaju | 72℃ | 30 iṣẹju-aaya/kb | |
Denaturation | 98℃ | 10 iṣẹju-aaya |
20 |
Annealing | 55℃ | 20 iṣẹju-aaya | |
Itẹsiwaju | 72℃ | 30 iṣẹju-aaya/kb | |
Ipari ipari | 72℃ | 5 min | 1 |
Awọn ẹya labẹ oriṣiriṣi Ilana imudara
Ilanal | Igbesẹ Meji | Igbesẹ mẹta | Annealing gradient |
Spec. | sare | alabọde | lọra |
Ni pato | ga | alabọde | ga |
Iye owo ti PCR | alabọde | ga | alabọde |
Oṣuwọn wiwa | ga | alabọde | ga |
Awọn akọsilẹ
Jọwọ wọ PPE pataki, iru ẹwu lab ati awọn ibọwọ, lati rii daju ilera ati ailewu rẹ!