DNAse I (Rnase Ọfẹ) (2u/ul)
Ologbo No: HC4007B
DNAase I jẹ endonuclease ti o le gbin DNA ti o ni ẹyọkan tabi ilopo meji.O le ṣe hydrolyze phosphodiester bonds lati ṣe agbejade mono-ati oligodeoxynucleotides ti o ni ẹgbẹ 5'-phosphate ati ẹgbẹ 3'-OH ninu.Iwọn pH iṣẹ ti o dara julọ ti DNAse I jẹ 7-8.Iṣẹ-ṣiṣe ti DNAse I da lori Ca2+ati pe o le muu ṣiṣẹ nipasẹ awọn ions irin divalent gẹgẹbi CO2, Mn2+, Zn2+, ati bẹbẹ lọ Ni iwaju Mg2+, DNase Mo ti le laileto cleave eyikeyi ojula ti ilopo-stranded DNA;Lakoko ti o wa niwaju Mn2+, DNase Mo le ya DNA ni ilopo-meji ni aaye kanna, ti o ṣẹda awọn opin ti o ṣofo tabi awọn opin alalepo pẹlu awọn nucleotides 1-2 ti n jade.O le ṣee lo fun sisẹ awọn oriṣiriṣi awọn ayẹwo RNA.
Awọn eroja
| Oruko | 1KU | 5KU |
| DNaseI Atunko (RNase-ọfẹ) | 500 μL | 5 ×500 μL |
| Idaduro Idahun DNAase I (10×) | 1 milimita | 5 × 1 milimita |
Awọn ipo ipamọ
Ọja yii yẹ ki o wa ni ipamọ ni -25 ~ -15 ℃ fun ọdun 2.Jọwọ yago fun didi-diẹ leralera.
Awọn ilana
Ti a lo si yiyọ DNA kuro ninu awọn ayẹwo RNA fun itọkasi nikan.
1. Jọwọ lo awọn tubes centrifuge-free RNase ati awọn imọran pipette lati ṣeto eto ifaseyin wọnyi:
| Awọn eroja | Iwọn didun (μL) |
| Idaduro Idahun DNAase I (10×) | 1 |
| DNasel atunko (RNase-ọfẹ) | 1 |
| RNA | X |
| RNase-ọfẹ ddH2O | Titi di 10 |
2. Awọn ipo iṣeduro jẹ bi atẹle: 37 ℃, lẹhin 15-30 mins, fi ifọkansi ikẹhin ti 2.5 mM EDTA ojutu ati ki o dapọ daradara, lẹhinna 65 ℃ fun 10 mins.Awoṣe ti a ṣe ilana le ṣee lo fun awọn idanwo RT-PCR atẹle tabi RT-qPCR, ati bẹbẹ lọ.
Awọn akọsilẹ
1. DNase l jẹ kókó si denaturation ti ara;Nigbati o ba dapọ, rọra yiyipada tube idanwo atimì jìgìn ganji, ma yin sisọsisọ.
2. Enzymu yẹ ki o wa ni ipamọ sinu apoti yinyin tabi lori yinyin nigba lilo, ati pe o yẹ ki o wa ni ipamọ ni -20 ℃ lẹsẹkẹsẹ lẹhin lilo.
3. Ọja yii wa fun lilo iwadi nikan.
4. Jọwọ ṣiṣẹ pẹlu awọn ẹwu laabu ati awọn ibọwọ isọnu, fun aabo rẹ.
