Gbogbo SYBR GREEN qPCR Premix (bulu)

Nọmba ologbo: HCB5041B

Universal Blue qPCR Master Mix (Dye Based) jẹ ojutu-ṣaaju fun 2 × akoko gidi pipo PCR pipo ti a ṣe afihan nipasẹ ifamọ giga ati pato, jẹ bulu ni awọ, ati pe o ni ipa ti wiwa afikun apẹẹrẹ.Awọn paati mojuto Taq DNA polymerase nlo agboguntako gbona ibere lati dojuti imunadoko amúṣantóbi ti kii-kan pato annealing alakoko nigba igbaradi ayẹwo.Ni akoko kanna, agbekalẹ naa ṣafikun awọn ifosiwewe igbega lati mu imudara imudara ti iṣe PCR dara ati dọgbadọgba imudara awọn jiini pẹlu awọn akoonu GC oriṣiriṣi (30 ~ 70%), ki PCR pipo le gba ibatan laini to dara ni titobi lọpọlọpọ. agbegbe.Ọja yii ni pataki ROX Itọkasi Itọkasi Palolo, eyiti o wulo fun ọpọlọpọ awọn ohun elo qPCR.Ko ṣe pataki lati ṣatunṣe ifọkansi ti ROX lori awọn ohun elo oriṣiriṣi.O jẹ dandan nikan lati ṣafikun awọn alakoko ati awọn awoṣe lati mura eto ifakalẹ fun imudara.

Awọn eroja

Universal Blue qPCR Titunto Mix

Awọn ipo ipamọ

Ọja naa wa pẹlu awọn akopọ yinyin ati pe o le wa ni ipamọ ni -25℃~-15℃ fun awọn oṣu 18.O jẹ dandan lati yago fun itanna ina to lagbara nigbati o tọju tabi ngbaradi eto ifaseyin.

Sipesifikesonu

Awọn ilana

1.Reaction System

[Akiyesi]: Darapọ daradara ṣaaju lilo lati yago fun awọn nyoju pupọ lati gbigbọn to lagbara.

a) Ifojusi alakoko: Ifojusi alakoko ikẹhin jẹ 0.2μmol/L, ati pe o tun le ṣatunṣe laarin 0.1 ati 1.0μmol/L bi o ṣe yẹ.

b) Idojukọ awoṣe: Ti awoṣe ba jẹ ojutu ọja iṣura cDNA ti ko ni diluted, iwọn didun ti a lo ko yẹ ki o kọja 1/10 ti iwọn didun lapapọ ti iṣesi qPCR.

c) Dilution Awoṣe: A ṣe iṣeduro lati dilute ojutu iṣura cDNA nipasẹ awọn akoko 5-10.Iwọn to dara julọ ti awoṣe ti a ṣafikun dara julọ nigbati iye Ct ti a gba nipasẹ imudara jẹ awọn akoko 20-30.

d) Eto ifasẹyin: A gba ọ niyanju lati lo 20μL tabi 50μL lati rii daju imunadoko ati atunṣe ti imudara jiini afojusun.

e) Igbaradi eto: Jọwọ mura silẹ ni ibujoko mimọ ti o mọ ki o lo awọn imọran ati awọn tubes ifaseyin laisi iyoku nuuclease;o niyanju lati lo awọn imọran pẹlu awọn katiriji àlẹmọ.Yago fun idoti agbelebu ati idoti aerosol.

2.Eto ifaseyin

Standard Eto

Awọn ọna Eto

[Akiyesi]: Eto ti o yara ni o dara fun ọpọlọpọ awọn Jiini, ati pe awọn eto boṣewa le ṣe idanwo fun awọn jiini igbekalẹ ile-iwe giga ti ara ẹni kọọkan.

a) Annealing otutu ati akoko: Jọwọ ṣatunṣe ni ibamu si ipari ti alakoko ati jiini afojusun.

b) Gbigba ifihan agbara Fluorescence (★): Jọwọ ṣeto ilana idanwo ni ibamu si awọn ibeere ninu awọn ilana fun lilo ohun elo.

c) Yiyọ ti tẹ: Eto aiyipada ohun elo le ṣee lo ni deede.

3. Abajade Analysis 

O kere ju awọn ẹda ti ibi mẹta ni a nilo fun awọn adanwo pipo.Lẹhin ifasẹyin naa, ohun ti tẹ ampilifaya ati iyipo yo nilo lati jẹrisi.

3.1 Iyipada imudara:

Awọn boṣewa ampilifaya ti tẹ ni S-sókè.Onínọmbà pipo jẹ deede julọ nigbati iye Ct ṣubu laarin 20 ati 30. Ti iye Ct ba kere ju 10, o jẹ dandan lati dilute awoṣe ki o tun ṣe idanwo naa lẹẹkansi.Nigbati iye Ct ba wa laarin 30-35, o jẹ dandan lati mu ifọkansi awoṣe pọ si tabi iwọn didun ti eto ifaseyin, ki o le mu imudara imudara ati rii daju pe iṣedede ti itupalẹ abajade.Nigbati iye Ct ba tobi ju 35 lọ, awọn abajade idanwo ko le ṣe itupalẹ ikosile ti jiini ni iwọn, ṣugbọn o le ṣee lo fun itupalẹ agbara.

3.2 Iyipada yo:

Awọn nikan tente oke ti yo ti tẹ tọkasi wipe awọn lenu pato ti o dara ati ki o pipo onínọmbà le wa ni ošišẹ ti;ti o ba ti yo ti tẹ fihan ė tabi ọpọ ga ju, pipo onínọmbà ko le wa ni ošišẹ ti.Yiyọ ti tẹ fihan awọn oke meji, ati pe o jẹ dandan lati ṣe idajọ boya oke ti kii ṣe ibi-afẹde jẹ dimer alakoko tabi imudara ti kii ṣe pato nipasẹ DNA agarose gel electrophoresis.Ti o ba jẹ dimer alakoko, o gba ọ niyanju lati dinku ifọkansi alakoko tabi tun ṣe awọn alakoko pẹlu ṣiṣe imudara giga.Ti ko ba jẹ imudara kan pato, jọwọ mu iwọn otutu annealing pọ si, tabi tun ṣe awọn alakoko pẹlu pato.

Awọn akọsilẹ

Jọwọ wọ PPE pataki, iru ẹwu lab ati awọn ibọwọ, lati rii daju ilera ati ailewu rẹ!

Ọja yii wa fun lilo iwadii NIKAN!